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熒光-PCR法的檢測局限性體現(xiàn)在哪些方面

更新日期: 2024-03-05
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動物源性成分廣泛分布于食品、飼料、化妝品等,與人們的生活息息相關(guān),其中食品和飼料所占的比例大。肉及肉制品摻假成為世界各國共同關(guān)注的熱點問題,肉食品及其飼料的安全隱患直接關(guān)系到人類的安危。近幾十年來,以PCR技術(shù)為核心的動物源性成分檢測獲得了廣泛應(yīng)用。
檢測方法的局限性:
1)樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
2)樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
3)陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
4)病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
5)不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
6)試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;
7)本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。
注意事項:
1)所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;檢驗過程中,參照《GB/T 27403實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測》的規(guī)定進(jìn)行;
2)試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;
3)反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
4)反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
5)使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服;
6)樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;
7)實驗完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8)試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進(jìn)行處理。
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